Жильцов И.В., Семенов В.М., Дмитраченко Т.И., Егоров С.К., Торосян Т.А., Прудников А.Р.
Природа бета-лактамазной активности ротовой жидкости
УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет», Республика Беларусь
Резюме.
Цель работы – уточнить механизмы устойчивости ротовой микрофлоры и выявить эндогенную устойчивость организма к бета-лактамным антибиотикам. Была исследована ротовая жидкость 75 пациентов с гнойно-воспалительными заболеваниями ротовой полости и 40 практически здоровых лиц. Определение бета-лактамазной активности ротовой жидкости производилось нитроцефиновым методом при помощи тест-системы «БиоЛактам». Для ингибирования бета-лактамазной активности в ротовую жидкость добавляли тазобактам в конечной концентрации 5 мг/мл. Для связывания альбумина в пробы ротовой жидкости (10 образцов) добавляли взвесь гранул голубой сефарозы. Фракционирование белков ротовой жидкости выполнялось при помощи препаративного диск-электрофореза в 7,5% полиакриламидном геле. Для оценки устойчивости 43 изолятов S. aureus к бета-лактамам был использован диско-диффузионный метод. Средний уровень бета-лактамазной активности слюны составил 41,4% (95% ДИ: 31,3…50,6). Бета-лактамазная активность слюны ≥45% указывает на высокую вероятность клинической неэффективности пенициллинов (включая аминопенициллины) и цефалоспоринов 1-3 поколений (чувствительность – 75,0%, специфичность – 89,6%, р<0,0001). Все эндогенные факторы макроорганизма обусловливают около 20% общего уровня бета-лактамазной активности ротовой жидкости, остальные 80% приходятся на бактериальные бета-лактамазы класса А. Штаммы S. aureus продуцируют бета-лактамазы, не являющиеся БЛРС, ввиду чего проявляют устойчивость только к пенициллинам, цефалоспоринам 1-2 поколений и аминопенициллинам. Устойчивость к бета-лактамным антибиотикам у S. aureus значимо чаще (p=0,0015) обусловлена неферментативными механизмами, чем продукцией бета-лактамаз, среди которых, вероятно, практически не встречаются БЛРС. Полученные данные необходимо учитывать при назначении стартовой эмпирической антибактериальной терапии гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области.
Ключевые слова: бета-лактамазная активность, ротовая жидкость, тест-система «БиоЛактам», эмпирическая антибактериальная терапия, гнойно-воспалительные заболевания челюстно-лицевой области.
Литература
1. Pérez-Llarena, F. J. Beta-lactamase inhibitors: the story so far / F. J. Pérez-Llarena, G. Bou // Curr. Med. Chem. – 2009. – Vol. 16, N 28. – P. 3740–3765.
2. Rolinson, G. N. Evolution of beta-lactamase inhibitors / G. N. Rolinson // Rev. Infect. Dis. – 1991 Jul-Aug. – Vol. 13, Suppl. 9. – P. S727–S732.
3. Sawai, T. Mechanisms of bacterial resistance to beta-lactams by beta-lactamases / T. Sawai // Nippon Rinsho. – 1997 May. – Vol. 55, N 5. – P. 1225–1230.
4. Buynak, J. D. The discovery and development of modified penicillin- and cephalosporin-derived beta-lactamase inhibitors / J. D. Buynak // Curr. Med. Chem. – 2004 Jul. – Vol. 11, N 14. – P. 1951–1964.
5. Nuotio, L. Antiresistance? / L. Nuotio // Med. Hypotheses. – 2009 Mar. – Vol. 72, N 3. – P. 250–251.
6. Dever, L. A. Mechanisms of bacterial resistance to antibiotics / L. A. Dever, T. S. Dermody // Arch. Intern. Med. – 1991 May. – Vol. 151, N 5. – P. 886–895.
7. Mealey, K. L. Penicillins and beta-lactamase inhibitor combinations / K. L. Mealey // J. Am. Vet. Med. Assoc. – 2001 Jun. – Vol. 218, N 12. – P. 1893–1896.
8. Livermore, D. M. Mechanisms of resistance to beta-lactam antibiotics / D. M. Livermore // Scand. J. Infect. Dis. Suppl. – 1991. – Vol. 78. – P. 7–16.
9. Nerli, B. An unknown hydrolase activity of human serum albumin: beta-lactamase activity / B. Nerli, F. García, G. Picó // Biochem. Mol. Biol. Int. – 1995 Nov. – Vol. 37, N 5. – P. 909–915.
10. Необычно высокий уровень распада антибиотиков бета-лактамной группы в человеческой плазме и сыворотке крови / И. В. Жильцов [и др.] // Международный Евро-Азиатский конгресс по инфекционным болезням, Витебск, 5-6 июня 2008 года : материалы. В 2 т. Т. 1. Актуальные вопросы инфекционной патологии. – Витебск, 2008. – C. 85–86.
11. Особенности взаимодействия антибиотиков бета-лактамного ряда с человеческим сывороточным альбумином / И. В. Жильцов [и др.] // Современные аспекты военной медицины : сб. науч. тр. Гл. военно-медиц. клин. центра «ГВКГ» МО Украины. – Киев, 2010. – Вып. 16. – C. 133-140.
12. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing; tenth informational suplement. NCCLS Document M100-S9 / National Committee for Clinical Laboratory Standards. – Wayne : National Committee for Clinical Laboratory Standards, 1999.
13. Прудников, А. Р. Уровень бета-лактамазной активности ротовой жидкости как подход к оптимизации антибактериальной терапии у пациентов с гнойно-воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области / А. Р. Прудников // Студенческая медицинская наука XXI века, посвященная 80-летию образования ВГМУ : материалы XIV междунар. науч.-практ. конф., Витебск, 23-24 окт. 2014 г. – Витебск : ВГМУ, 2014. – С. 156–157.
14. Nerli, B. Evidence of human serum albumin beta-lactamase activity / B. Nerli, G. Picó // Biochem. Mol. Biol. Int. – 1994 Mar. – Vol. 32, N 4. – P. 789–795.
15. Novel method for detection of b-lactamases by using a chromogenic cephalosporin substrate / H. C. O’Callaghan [et al.] // Antimicrobial agents and chemotherapy. – 1972 Apr. – Vol. 1, N 4. – P. 283-288.
Сведения об авторах:
Жильцов И.В. – д.м.н., профессор кафедры инфекционных болезней УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»;
Семенов В.М. – д.м.н., профессор, заведующий кафедрой инфекционных болезней УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»;
Дмитраченко Т.И. – д.м.н., профессор кафедры инфекционных болезней УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»;
Егоров С.К. – аспирант кафедры инфекционных болезней УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»;
Торосян Т.А. – ассистент кафедры челюстно-лицевой хирургии и стоматологии детского возраста УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»;
Прудников А.Р. – студент 6 курса лечебного факультета УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет».
Адрес для корреспонденции: Республика Беларусь, 210023, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет», кафедра инфекционных болезней. Тел.моб.: +375 (29) 710-43-68, e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра. – Жильцов Иван Викторович.
